BƯỚC ĐẦU THIẾT LẬP QUY TRÌNH THU NHẬN EXOSOME TỪ DỊCH NUÔI CẤY TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ TỪ MÔ MỠ HƯỚNG ĐẾN ỨNG DỤNG TRONG Y HỌC TÁI TẠO

Ngô Thái Minh Quân1, Trần Công Toại1, , Huỳnh Duy Thảo2, Nguyễn Tuấn Kiệt2, Dương Thị Phương Thanh2, Trương Quốc Kỳ2, Tô Minh Quân3, Trương Công Hòa2, Nguyễn Thanh Bình2,4, Ngô Minh Vinh2
1 Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch
2 Trường Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch
3 Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh
4 Trường Đại học Thủ Dầu Một

Nội dung chính của bài viết

Tóm tắt

  Đặt vấn đề: Exosome đang mở ra một hướng đi mới trong y học tái tạo với khả năng hỗ trợ, sửa chữa và phục hồi mô bị tổn thương. Tiềm năng của chúng trong việc cải thiện sức khỏe và điều trị các bệnh lý phức tạp là rất lớn. Trong tương lai, exosome có thể trở thành một công cụ mạnh mẽ và phổ biến trong y học tái tạo. Mục tiêu nghiên cứu: Nghiên cứu bước đầu thiết lập quy trình phân lập, thu nhận và định danh nguồn exosome để cung cấp nguồn exosome đạt tiêu chuẩn và an toàn để phục vụ cho các nghiên cứu trong sinh học và y học. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Tế bào gốc trung mô được phân lập từ mô mỡ người. Dịch nuôi cấy tế bào sau đó được thu nhận làm nguồn nguyên liệu để phân lập exosome. Exosome sau khi thu nhận được đánh giá và định danh dựa vào các tiêu chuẩn hình thái, kích thước và sự biểu hiện protein bề mặt theo tiêu chuẩn ISEV. Sản phẩm exosome cũng được định lượng nồng độ protein bằng phương pháp Bradford và đánh giá sự an toàn qua phương pháp đánh giá độ vô khuẩn và sự hiện diện của một số kim loại nặng. Kết quả: Dịch sản phẩm exosome sau khi thu nhận có chứa các túi exosome có dạng hình cầu, kích thước các exosome nằm trong khoảng 30 – 200 nm. Các hạt exosome biểu hiện được các protein CD9, CD63 và CD81 bằng flow cytometry. Dịch exosome có nồng độ khoảng 45.22 µg/ml và không có hiện diện một số kim loại nặng được khảo sát như Chì, Cadmium, Asen và Thuỷ Ngân. Kết luận: Sản phẩm exosome đạt tiêu chuẩn theo tiêu chuẩn quốc tế ISEV, đảm bảo an toàn và chất lượng đặc biệt là các nghiên cứu hướng đến y học tái tạo.

Chi tiết bài viết

Tài liệu tham khảo

1. Welsh J.A., Goberdhan D.C.I., O'Driscoll L., Buzas E.I., Blenkiron C., et al. Minimal information for studies of extracellular vesicles (MISEV2023): From basic to advanced approaches. Journal of extracellular vesicles. 2024. 13(2), e12404. doi: 10.1002/jev2.12404.
2. Chen J., Li P., Zhang T., Xu Z., Huang X., et al. Review on Strategies and Technologies for Exosome Isolation and Purification. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 2022. 9 (811971), 1-18. doi: 10.3389/fbioe.2021.811971.
3. Huỳnh Duy Thảo, Trần Lê Bảo Hà, Lê Thanh Hùng, Võ Quốc Vũ, Hoàng Kc Hương và cộng sự. Nghiên cứu quy trình thu nhận tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người hướng đến ứng dụng trong lĩnh vực y học. Y Học TP. Hồ Chí Minh. 2013. 17(2), 133-140.
4. Sidhom K., Obi P.O., and Saleem A. A Review of Exosomal Isolation Methods: Is Size Exclusion Chromatography the Best Option? International Journal of Molecular Sciences. 2020. 21(18), 1-19. doi: 10.3390/ijms21186466.
5. Hoang Huong Diem, Bui Thi Van Khanh, Hoang Thi My Nhung, Nguyen Thanh Liem, Than Thi Trang Uyen. Initial characterisation of exosomes released by umbilical cord-derived mesenchymal stem cells and mature dendritic cells, under ‘Good Manufacturing Practice’ conditions. Vietnam Journal of Science, Technology and Engineering. 2019. 61(3), 45-51. doi:
10.31276/VJSTE.
6. Nam HB Tran, Diem DN Nguyen, Ngoc Mai Nguyen, Chau Tran, Ngoc Thanh Nguyen Thi et al. Dual-targeting exosomes for improved drug delivery in breast cancer. Nanomedicine. 2023. 18(7), 599-611. doi: 10.2217/nnm-2022-0328.
7. Yang Q., Li S., Ou H., Zhang Y., Zhu G., et al. Exosome-based delivery strategies for tumor therapy: an update on modification, loading, and clinical application. Journal of Nanobiotechnology. 2024. 22(1), 1-41. doi: 10.1186/s12951-024-02298-7.
8. Zhou T., He C., Lai P., Yang Z., Liu Y., et al. miR-204-containing exosomes ameliorate
GVHD-associated dry eye disease. Science advances. 2022. 8(2), 1-14. doi: 10.1126/sciadv.abj9617.
9. Adelipour M., Lubman D.M., and Kim J. Potential applications of mesenchymal stem cells and their derived exosomes in regenerative medicine. Expert Opinion on Biological Therapy. 2023. 23(6), 491-507. doi: 10.1080/14712598.2023.2211203.
10. Lopes D., Lopes J., Pereira-Silva M., Peixoto D., Rabiee N., et al. Bioengineered exosomalmembrane-camouflaged abiotic nanocarriers: neurodegenerative diseases, tissue engineering and regenerative medicine. Military medical research. 2023. 10(1), 1-26. doi: 10.1186/s40779023-00453-z.